Hiệu quả của chiết xuất nhau thai heo trên sự tổng hợp collagen ở nguyên bào sợi da người In vitro

Tóm tắt 
 Chiết xuất từ ​​nhau thai (PE) đã được sử dụng như một phương thuốc dân gian tại các nước châu Á. Chiết xuất nhau thai người được sử dụng trên lâm sàng cho điều trị nhăn da nhờ thúc đẩy tái tạo da. Trong nghiên cứu này, chúng tôi thấy rằng  chiết xuất nhau thai heo (PPE) thúc đẩy sản sinh collagen bởi các nguyên bào sợi da người (NHDFs). Các nguyên bào sợi NHDFs được điều trị với PPE ở nồng độ 12,5-100 mg / ml giúp tăng cường sự phát triển và tiết procollagen C peptide. Chúng tôi cũng thấy rằng biểu hiện của chất nền dịch ngoại bào Metalloproteinase-9 (MMP-9) trong các nguyên bào sợi NHDFs được điều trị PPE đã giảm phụ thuộc vào liều sử dụng.  Những kết quả này chỉ ra rằng PPE có thể ảnh hưởng đến nếp nhăn trên khuôn mặt  bằng cách tăng cường nguyên bào sợi  tăng sinh và tiết collagen trong khi ức chế sự biểu hiện của MMP-9  trong NHDFs.

Giới thiệu
Nhau thai là một cơ quan xuất hiện tạm thời trong thời gian mang thai , là nguồn cung cấp oxy và chất dinh dưỡng để thai nhi phát triển [1] . Nó bị thải ra khỏi cơ thể sau khi sinh và các chất dinh dưỡng có thể được chiết xuất để tạo thành chiết xuất nhau thai (PE) . Chiết xuất nhau thai như báo cáo chứa các enzyme như  photphat  axit kiềm,  glutamic oxalo acetic transaminase , axit nucleic , vitamin, acid amin , steroid , axit béo , và khoáng chất [2] . Chiết xuất nhau thai là một phương thuốc cổ truyền sử dụng cho chữa lành vết thương , vì khả năng kích thích miễn dịch và hoạt động chống viêm , sử dụng như là một thành phần mỹ phẩm bổ sung ở nhiều nước châu Á [3]. Ở châu Á, tiêm dưới da hoặc tiêm bắp dịch chiết nhau thai  người PE ( HPE ) , một  sản phẩm thủy phân của nhau thai  người có tên thương mại Laennec (Japan Bio Products, Tokyo, Nhật Bản ) , đã được sử dụng gần đây để điều trị các rối loạn khác nhau bao gồm các triệu chứng mãn kinh , vết thương không lành,  loét giãn tĩnh mạch mãn tính [ 4-7 ] . Hơn nữa, HPE ứng dụng trong lâm sàng và thẩm mỹ được sử dụng để điều trị  nếp nhăn da vì khả năng thúc đẩy tái tạo da [ 8,9 ] . HPE là cũng là một trong các thành phần trong thuốc mỡ bôi da vì  khả năng thúc đẩy tái tạo da và sự tăng trưởng của các melanocyte  cũng như trong điều trị da nhạy cảm như viêm da và bệnh vẩy nến [10].

Gần đây, chiết xuất nhau thai heo PE (PPE) đã được phát triển dưới dạng thực phẩm chức năng cho các mục đích tương tự như HPE. Trong một nghiên cứu trước đây, PPE đã sử dụng để chữa lành vết thương ở chuột với các vết thương do bỏng [11]. Điều trị bằng PPE cũng ức chế sự kích hoạt của các tế bào trình diện kháng nguyên bao gồm các đại thực bào, dẫn đến giảm các cytokine gây viêm, cho thấy một tiềm năng ứng dụng điều trị của PPE trong bệnh viêm da [12]. Nghiên cứu trước đây của chúng tôi chứng minh  PPE dùng đường uống có hiệu quả đáng kể cho việc giảm đầu gối đau ở phụ nữ  tiền mãn kinh và mãn kinh. Nếp nhăn là do sự lão hóa, di truyền và các yếu tố môi trường như tia cực tím, thuốc lá và estrogen [15-19]. Trong số những yếu tố này, mức độ nghiêm trọng của các nếp nhăn tương quan mạnh mẽ với tuổi. Ở người, da lão hóa sẽ trở nên mỏng do giảm elastin, glycosamino glycans và collagen.

Collagen là một loại protein dạng sợi chiếm phần lớn trong chất nền ngoại bào và là một thành phần chính của các mô liên kết trong cơ thể con người. Khoảng 3-6% tổng số protein mô trong cơ thể là collagen và các tính chất chức năng của da phụ thuộc vào sự toàn vẹn của collagen trong lớp hạ bì. Thay đổi trong biểu hiện collagen xảy ra trong quá trình lành vết thương,sự  phát triển xương mới, và quá trình lão hóa [24]. Vì vậy, việc kiểm soát trao đổi chất collagen có thể có ích cho một loạt các điều trị và ứng dụng mỹ phẩm.

Chúng tôi  thấy rằng  PPE sử dụng đường uống cho phụ nữ tiền mãn kinh và mãn kinh dẫn đến giảm chiều rộng của các nếp nhăn dưới đây mắt. Tuy nhiên, cơ chế điều tiết tổng hợp collagen trong nguyên bào sợi ở người bằng PPE chưa được làm sáng tỏ chi tiết. Trong này nghiên cứu, chúng tôi thấy rằng PPE kích thích tổng hợp collagen và ức chế tiết một enzyme làm giảm collagen Metalloproteinase (MMP) -9 trong nguyên bào sợi da người (NHDFs).

Vật liệu và phương pháp
PPE
PPE (JBP porcine 100, Tokyo, Nhật Bản) được sử dụng trong nghiên cứu này được cung cấp từ công ty Japan Bio Products. Nhau thai heo được thu thập ở Nhật Bản và được xử lý bằng một protease và khử trùng nhiệt trước khi đông khô, tán nhỏ và đóng viên nang. Các thành phần của viên nang được hòa tan trong nước cất để sử dụng trong các thí nghiệm

Nuôi cấy tế bào
NHDFs được thu thập từ bao quy đầu ở trẻ sơ sinh và mua từ Takara Bio (Shiga, Nhật Bản). Các tế bào được nuôi trong môi trường Dulbecco’s Modified Eagle’s (DMEM; Sigma-Aldrich, St Louis, Mỹ) bổ sung 10% huyết thanh thai bê (FBS) ở 37 ° C với 5% CO2.

Xét nghiệm tăng sinh tế bào
Tăng sinh tế bào được đánh giá bằng một phân tích MTT [25]. NHDFs (1 × 104 tế bào / ml) được nuôi cấy trong đĩa 96 giếng với DMEM có chứa 10% FBS trong 2 giờ. PPE đã được thêm vào môi trường ở nồng độ khác nhau, và sau đó các tế bào được ủ trong 48 giờ. Môi trường  đã được hút và thay thế bằng 100 µl môi trường mới và 20 µl dung dịch MTT (0,5% (w / v) ở Ca2+ / Mg2 + tự dom Phosphate-Buffered Saline [PBS]; Nacarai Tesque, Kyoto, Nhật Bản) mỗi giếng sau 4h ủ. Sau đó, 150 µl dung dịch SDS cũng đã được thêm vào mỗi giếng, tiếp tục ủ 18 h. Các tấm sau đó được lắc trong 15 phút và đọc kết quả hấp thụ tại bước sóng 570-nm.

Đo lượng procollagen Ι C-peptide (PIP) bằng xét nghiệm Enzyme miễn dịch (EIA) PIP đã được sử dụng như một dấu hiệu (marker) cho tiết procollagen. NHDFs (1 × 104 tế bào / ml) được nuôi cấy trong 24 tấm với DMEM chứa 10% FBS. Tại 80% hội lưu, môi trường đã được thay thế bằng DMEM chứa 0,5% FBS, và các tế bào được nuôi cấy qua đêm. Sau đó, tế bào được kích thích với nồng độ khác nhau của PPE, dịch nổi nuôi cấy đã được thu hoạch sau 24-72 h và đông lạnh ở -80 ° C cho đến khi sử dụng. Mức độ PIP trong nước nổi được đo bằng một bộ kit EIA có sẵn (Takara Bio, Shiga, Nhật Bản) theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

Phân tích Western blot
NHDFs được nuôi cấy trong các đĩa 60 – mm với DMEM chứa 10 % FBS . Phương pháp nuôi cấy các tế bào tương tự như mô tả để xác định mức độ PIP. Tóm lại, sau 72 giờ nuôi cấy, các tế bào được ly giải với một đệm phân tích thay đổi  miễn dịch sửa  chứa protease và chất ức chế  (1 µg/mL aprotinin, 1 µg/mL leupeptin, 1 µg/mL pepstatinA, 100 mM PMSF, 200 mM NaVO3, 100 mMNaF, and  2×complete Mini; (Roche applied science, Mannheim, Germany)) . Dịch ly giải được ly tâm để loại bỏ mảnh vụn tế bào, và dịch nổi được thu thập để thu chiết xuất protein. Nồng độ protein được đo bằng một bộ xét nghiệm protein BCA ( Thermo Fisher Scientific , Hoa Kỳ ) . Mỗi mẫu protein ( 10 mg ) được  phân đoạn kích thước bởi điện di gel polyacrylamide SDS sử dụng 12 % gel nhỏ TGX protean ( Bio-Rad Laboratories , CA, USA ) . Protein tách đã được chuyển  qua màng poly vinylidene fluoride ( GE Healthcare ,Anh ) . Màng sau được cố định trong 1 giờ ở nhiệt độ phòng với PBS chứa 5% bột sữa không béo, 0,05 % Tween 20 (PBS -T ) và sau đó ủ với kháng thể gốc pha loãng trong PBS -T ở 4 ° C. Các kháng thể gốc là kháng thể  MMP-9 thỏ ( 1:1000 ) và kháng thể β – actin chuột ( 1:5000 ) (Santa Cruz Biotechnology, TX, USA). Màng được rửa nhiều lần với PBS-T và sau đó ủ với kháng thể thứ cấp pha loãng trong PBS-T trong 1 giờ tại nhiệt độ phòng. Kháng thể thứ cấp kháng thể dê kháng kháng thể thỏ IgG Horseradish peroxidase (HRP) (1:2000) và kháng thể lừa con lừa kháng kháng thể  chuột IgG-HRP (1:5000) mua từ Santa biotechnology. Màng được rửa nhiều lần với PBS-T và nước Milli-Q. Phản ứng protein đã được hình dung với thuốc thử phát hiện ECL và kỹ thuật tự chụp phóng xạ sử dụng phim chụp phóng xạ hiệu năng cao (GE Healthcare UK Ltd, Buckinghamshire, England).

Phân tích thống kê
Kết quả được thể hiện bằng trung bình ±  Độ lệch chuẩn (SD). Sự khác biệt giữa các nhóm được đánh giá bằng các thử nghiệm trên Wilcox signedrank. Phân tích Mann-Whitney U nonparametric được sử dụng để đánh giá sự khác biệt giữa hai nhóm. P <0,05 được coi là ý nghĩa thống kê.

Kết quả
PPE  thúc đẩy tăng sinh NHDF
Các nguyên bào sợi da tổng hợp các protein nền ngoại bào bao gồm collagen  đóng một vai trò quan trọng trong việc tái tạo da [26]. Chúng tôi đầu tiên nghiên cứu về ảnh hưởng của PPE trên sự  tăng sinh của NHDFs được nuôi cấy. Như được chỉ ra trong Hình 1, NHDFs điều trị bằng 100 µg / mL PPE cho thấy tốc độ tăng sinh cao hơn so với  nhóm đối chứng. Khả năng của PPE trong tăng sự phát triển tế bào là liều phụ thuộc vào nồng độ trong khoảng 6,25-100 µg / ml (Hình 1A). Trong 24-72 h nuôi cấy, 50 µg / ml PPE đã tăng cường phát triển tế bào so với trong nhóm đối chứng.

Ảnh hưởng của PPE đến sự tổng hợp PIP
Để khảo sát sự tác động của PPE trên tổng hợp collagen và / hoặc tiết ra bởi các NHDFs, chúng tôi đo lượng PIP trong dịch nổi của các NHDFs sau khi kích thích với PPE. Như minh họa trong Hình 2, các tế bào được điều trị bằng PPE tổng hợp PIP phụ thuộc vào liều PPE. Nồng độ PIP trong dịch nổi tích lũy. đáng kể trong vòng 72 giờ sau khi thêm 50 µg / ml PPE, trong khi đó nồng độ PIP đã giảm ở 200 µg / ml PPE (Hình 2A và 2B).

Ảnh hưởng của PPE trên sự biểu hiện nội bào tế của MMP-9 trong NHDFs
MMP-9 là một thành viên của họ  các metalloproteinase có vai trò tổ chức lại chất nền ngoài bào, đã được chứng minh đóng một vai trò quan trọng trong suy thoái collagen [27]. Do đó chúng tôi nghiên cứu tác động của PPE trên MMP-9 biểu hiện trong NHDFs. Sau 72 h nuôi cấy, phân tích Western Blot tiết lộ rằng PPE với nồng độ trong khoảng 12,5-50 µg / ml giảm đáng kể  sự biểu hiện MMP-9  phụ thuộc vào liều PPE (Hình 3).

Thảo luận
HPE được sử dụng để bổ sung cho mỹ phẩm chăm sóc da và da bị nám [9]. Nó cũng đã được báo cáo đóng một vai trò trong việc da tái tạo [8,9]. Tuy nhiên, các ứng dụng PPE chưa bao gồm cải thiện sự xuất hiện của nếp nhăn. Được biết, phân tử tiền collagen (procollagen) được tổng hợp trong các nguyên bào sợi [26]. Trong nghiên cứu này, chúng tôi thấy rằng sự gia tăng của các nguyên bào sợi được tăng cường bởi PPE.
Một nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng PPE kích thích các nguyên bào sợi da vào giai đoạn S và làm tăng mức độ protein yếu tố tăng trưởng tế bào sợi FGF, kết quả này cũng phù hợp với kết quả của chúng tôi.

Chúng tôi cũng thấy rằng PPE tăng đáng kể sản tổng hợp collagen trong NHDFs tại 72 h của văn hóa, cho thấy PPE có ảnh hưởng  kích thích đến sản xuất collagen. Collagen da có vai trò trung tâm trong độ bền cơ học của da như một thành phần của chất nền ngoại bào. Lắp ráp cấu thành chủ yếu được khởi xướng bởi sự tăng trưởng yếu tố và kích thích tố như estrogen [28]. Sự suy giảm của da nội dung collagen sau khi mãn kinh là một yếu tố quan trọng trong sự xuất hiện của nếp nhăn. Sự lắp ráp để tạo thành kết cấu của collagen khởi đầu chủ yếu bởi yếu tố tăng trưởng và các hormone ví dụ như Estrogen. Sự suy giảm collagen của da sau mãn kinh là một yếu tố quan trọng trong sự xuất hiện của nếp nhăn. Hơn nữa, có một sự tương quan mạnh mẽ giữa việc  mất collagen ở da và thiếu hụt estrogen trong thời kỳ mãn kinh, và điều đó cũng cho thấy rằng thiếu hụt estrogen có thể được tham gia vào việc giảm collagen da, dẫn đến da nhăn ở phụ nữ mãn kinh.

Nghiên cứu gần đây của chúng tôi đã chứng minh rằng phụ nữ được điều trị bằng Liệu pháp thay thế hormon cho thấy giảm đáng kể chiều rộng của các nếp nhăn so với phụ nữ không được điều trị [29]. PPE không  ảnh hưởng đến mật độ khoáng của xương hoặc trọng lượng của tử cung ở những con chuột cái đã bị cắt buồng trứng và ở phụ nữ mãn kinh sau 24 tuần điều trị bằng PPE mức độ estrogen huyết thanh hoặc hormone tuyến giáp không bị ảnh hưởng[14]. Điều này cho thấy estrogen và hormon tuyến giáp không tham gia vào các hiệu ứng hoạt tính sinh học qua trung gian PPE . Thật vậy, progesterone và oestradiol  ít có ảnh hưởng đến tăng sinh tế bào [11]. Do đó, khả năng cảm ứng tăng sinh tế bào và tổng hợp collagen bởi PPE không gây ra bởi những hormone này. Số lượng collagen dưới da là kết quả tổng hợp và suy thoái. MMPs là một họ  các enzym liên quan đến cấu trúc, bao gồm collagenase-1 (MMP-1), collagenase-3 (MMP-13), gelatinase A và B (MMP-2 và MMP-9), stromelysin (MMP-3), và MMP membranetype, có khả năng làm giảm tất cả các thành phần của chất nền ngoại bào như collagen, elastin, fibronectin, proteoglycan, và laminin [27]. Đặc biệt, MMP-1 phá hủy các sợi collagen  loại I và loại III, MMP-9 phá hủy các mảnh vỡ collagen và MMP-3 phá hủy collagen loại IV và kích hoạt pro-MMP-1. Trong nghiên cứu này, PPE làm giảm nồng độ protein của MMP-9 trong NHDFs. Vì vậy, kết quả này cho thấy rằng PPE ngăn chặn sự xuống cấp của collagen bằng cách làm giảm sự biểu hiện của protein MMP-9. Để  khảo sát mối quan hệ giữa mRNA và sự biểu hiện proteinMMP-9,phản ứng Real- time RT PCR  đã được thực hiện. Kết quả là nồng độ của mRNA MMP-9  thấp, trong khi các giá trị biểu hiện của MMP-9 rất khác nhau trong phương pháp RT-PCR. Kết quả chúng tôi quan sát được là PPE có xu hướng ngăn chặn sự biểu hiện mRNA . Một hạn chế của nghiên cứu này là chúng tôi đã không xác định thành phần hoạt động trong PPE có ảnh hưởng đến tổng hợp collagen. Nghiên cứu sâu hơn là cần thiết để xác định thành phần hoạt động trong PPE. Tuy nhiên, các chất này trong PPE có thể sẽ là các phân tử nhỏ bao gồm tripeptides và dipeptides, bởi vì PPE đã thể hiện hoạt tính sinh học qua đường uống để điều trị nếp nhăn, các triệu chứng thời kỳ mãn kinh, và khớp gối [13,14]. Collagen được đặc trưng bởi một cấu trúc  ba xoắn ốc với một chuỗi lặp đi lặp lại của Glycine (G)-XY, trong đó  amino axit X và Y xuất hiện chủ yếu tương ứng là proline  và hydroxyl proline [32]. Togashi và cộng sự đã báo cáo rằng HPE chứa các tripeptides G-X-Y [32]. Các tripeptide G-X-Y  đã được báo cáo là có khả năng  làm tăng collagen và axit hyaluronic trong các nguyên bào sợi nuôi cấy [33]. Chúng tôi gần đây đã tiến hành phân tích axit amin và thấy rằng PPE chứa proline và hydroxyl proline. Chúng tôi cũng đang tiến hành phân tích các thành phần hoạt động, đặc biệt các peptide trong PPE.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi thấy rằng PPE kích thích sự tăng sinh của NHDFs cũng như tổng hợp collagen và ức chế tổng hợp MMP-9. Các nguyên bào sợi được báo cáo là có khả năng tổng hợp collagen và liên kết các sợ collagen nhỏ thông qua Integrin, từ đó điều chỉnh độ dày của da [34,35]. Khả năng tăng sinh tế bào được điều hòa bởi yếu tố xung quanh, đặc biệt là liên quan đến độ dày lớp hạ bì liên quan đến sự tổng hợp collagen của nguyên bào sợi [36,37].

Do đó, chúng tôi đã thảo luận rằng PPE có tác dụng hiệu quả trong chữa lành vết thương hay nếp nhăn nhờ sự phân chia của các tế bào và collagen được tiết ra bù đắp các khoảng trống của mô. Sử dụng PPE kết hợp với mỹ phẩm trong điều trị nếp nhăn trên mặt có thể mang đến những hiệu quả  như điều trị với HPE.

Hiệu quả của tinh chất nhau thai heo bổ sung cho liệu pháp điều trị Hocmon ở phụ nữ tiền mãn kinh đối với chứng bệnh đau khớp gối

K. Koike, Y. Yamamoto, N. Suzuki^*, R. Yamazaki, C. Yosbikawa, K. Takuma, K. Sugiura and M. Inoue
Khoa phụ sản và Khoa bổ sung, thay thế thuốc, Đại học khoa học quốc tế Kanazawa, Ishikawa; Phòng thí nghiệm dược lý thuốc, trường Đại học khoa học Dược phẩm; Đại học Osaka, Sugiura Clinic, Hikarigaoka, Kanazawa, Ishikawa, Nhật Bản.
Từ khóa: Dịch chiết nhau thai heo, đau đầu gối, HRT, liệu pháp bổ sung, bổ sung và thay thế thuốc
______________________________________________________________________________
TÓM TẮT
Mục tiêu:Viêm xương khớp, đau khớp gia tăng theo độ tuổi, đặc biệt hay gặp ở phụ nữ tuổi trung niên. Mặc dù liệu pháp thay thế hóc môn (Hormon replacement therapy – HRT) cải thiện triệu chứng đau khớp nhưng đối với những phụ nữ chưa thích ứng vớiHRT cần phải có liệu pháp bổ sung hiệu quả. Mục tiêu của thử nghiệm này là đánh giá tác dụng của dịch chiết nhau thai heo (porcine placental extract-PPE) dạng viên uống có hiệu quả như thế nào khi sử dụng như một liệu pháp bổ sung HRT.
Phương pháp:Phụ nữ tiền mãn kinh 48 tuổi bị đau xương khớp đã trải qua liệu pháp HRT tham gia vào thử nghiệm mở, ngẫu nhiên, có kiểm soát. Các đối tượng nghiên cứu được sắp xếp ngẫu nhiên vào nhóm 1 (n=24), nhóm 2 (n=24). Đối tượng nhóm 1 điều trị bằng canxi (260 mg/ngày) trong 3 tháng như một liệu pháp bổ sung song song với HRT. Nhóm 2 điều trị bằng PPE (9 viên/ngày) như một liệu pháp bổ sung song song với HRT.Sự thay đổi mức độ đau xương khớp được đánh giá bằng Visual Analog Scale (VAS).
Kết quả: Điều trịvới PPE có tác dụng giảm đau tốt thông qua chỉ số VASở thời điểm 4 tuần (p<0.05), 8 tuần (p<0.01) và 12 tuần (p<0.01), kết quả này được so sánh với nhóm chứng. Và tác dụng tiếp diễn sau 4 tuần dùng thuốcở nhóm chứng được so sánh với tác dụng sau khi ngừng sử dụng PPE ở nhóm thử.Điều trị với PPE không xuất hiện bất kỳ tác dụng bất lợi nào về công thức máu, khả năng chuyển hóa, đặc biệt các vấn để liên quan đến tim mạch.
Kết luận:Uống bổ sung PPE là một lựa chọn khả thi để hỗ trợ điều trị bằng phương pháp HRT khi đau khớp gối kéo dài.

GIỚI THIỆU
Tỷ lệ mắc bệnh viêm xương khớp (Osteoarthritis-OA) gia tăng theo tuổi tác và thường gặp ở nữ giới hơn nam giới. Khoảng 25%số ngườiở độ tuổi 55 và trên 55 bịđau xương khớp triền miên nhiều ngày trong tháng.Có gần một nửa chụp X quang ở đầu gối phát hiện bị OA nhưng hơn một nửa ở giai đoạn đầu của OA, kết quả này khôngđược hiển thị trên X quang.OA là nguyên nhân chính gây vận động khó khăn ở người cao tuổi. Yếu tố nguy cơ của OA bao gồm: tuổi tác, giới tính (nữ mắc nhiều hơn), di truyền, béo phì và chấn thương khớp.
Hiện nay, phương pháp chữa trị OA còn chưa triệt để, đa phần sử dụng các thuốc giảm đau làm cắt cơn đau của bệnh nhân. Các phương pháp điều trị OA thông dụng là sử dụng các thuốc giảm đau như thuốc nhóm NSAIDs, các bài tập thể dục, phương pháp chườm nóng lạnh, giảm cân, mátxa, tiêm corticoid steroid và phẫu thuật khớp.Trong các phương pháp trên, NSAIDs là thuốcđược sử dụng rộng rãi cho OA, tuy nhiên có thể dẫn đến nhiều tác dụng bất lợi khi sử dụng NSAIDs kéo dài.Mặt khác, các loại thuốcuống bổ sung (complementary or alternative medicine-CAM) để hỗ trợ điều trị OA thường được sử dụng nhằm giảm đau và phần lớn những người sử dụng CAM đều tin rằng bằng cách này sẽ không gây tác dụng phụ. Thực phẩm chức năng như glucosamine, chondroitin được khuyến khích sử dụng bởi các phương tiện truyền thông và những người nghiên cứu như là một lựa chọn an toàn và hiệu quả để hạn chế OA tiến triển. Tuy nhiên mặc dù theo nghiên cứu phân tích meta đánh giá hiệu quả các loại thuốc uống bổ sung này đối với hỗ trợ điều trị OA thì thử nghiệm đa chiều lại đưa ra kết quả rằng glucosamine và chondroitin không giúp cải thiện cơn đau cho bệnh nhân viêm khớp gối.
Các nhà thuốc điều trị bằng phương pháp cổ truyềnở châu Á đã và đang sử dụng tinh chất nhau thai. Ở Nhật Bản, dịch chiết nhau thai người thủy phân có tên thương mại là Laennec (Japan Bio Products Ltd., Tokyo) được công nhận với hiệu quả điều trị các bệnh viêm gan, xơ gan vì có tác dụng tăng sinh tế bào gan.Ngoài ra, dịch chiết nhau thai người bằng cách tiêm dưới da hoặc tiêm bắp còn đem lại nhiều hiệu quả trên các bệnh khác như: rối loạn mãn kinh, da liễu, không lành vết thương. Có báo cáo thử nghiệm trên OA ghi rằng, dịch chiết nhau thai người tiêm trong khớp gối có hiệu quả tốt trên bệnh nhân OA mạn tính.
Những năm gần đây, chiết xuất nhau thai heo (PPE) được điều chế thành thực phẩm chức năng dưới dạng viên uống mong đạt hiệu quả gần với chiết xuất nhau thai người, tuy nhiên bằng chứng nghiên cứu về công dụng này còn chưa đầy đủ. Vì thế chúng tôi tiến hành nghiên cứu xem liệu PPE có tác động trên bệnh nhân đau khớp như một giải pháp bổ sung cho liệu pháp HRT không, liệu pháp được xem là hiệu quả an toàn đối với bệnh đau khớp gối.

NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Thiết kế nghiên cứu
Phụ nữ tiền mãn kinh, 48 tuổi, đau khớp gối tham gia thử nghiệm lâm sàng. Các phụ nữ này đã từng sử dụng liệu pháp estrogen đơn lẻ (estrogen-alone therapy-ET) hoặc đã từng điều trị HRT liên tục trong ít nhất 6 tháng, đăng ký vào thử nghiệm mở, ngẫu nhiên, có kiểm soát. Các đối tượng được sắp xếp ngẫu nhiên trong nhóm 1 (n=24), nhóm 2 (n=24). Đối tượng cả 2 nhóm được tiếp tục điều trị bằng liệu pháp ET hoặc HRT trong 3 tháng tiếp theo, sau đó đối tượng ở nhóm 1 được điều trị bổ sung canxi (260 mg/ngày) cùng với liệu pháp HRT hoặc ET trong 3 tháng đó. Thử nghiệm này được cấp phép bởi hội đồng đánh giá nhân đạo thuộc Hiệp hội thuốc uống bổ sung Nhật Bản và được ký cam kết bởi các đối tượngtham thử nghiệm.

Đối tượng tham gia
Đặc điểm đối tượng tham gia thử nghiệm cả hai nhóm được ghi trong bảng 1.Sự khác nhau về đặc điểm các đối tượng tham gia trong 2 nhóm không có ý nghĩa. Chỉ số khối lượng cơ thể (BMI) (±độ lệch chuẩn) của nhóm đối chứng là 21.7 ± 2.6 kg/m² (phạm vi 17 – 25.8 kg/m²), nhóm PPE là 21.9 ± 2.6 kg/m² (phạm vi 17.3 – 25.9 kg/m²). Thời gian đau khớp của nhóm chứng là 37.7 ± 24.9 tháng (pham vi 6 – 105 tháng), nhóm PPE là 34.5 ± 20.7 tháng (phạm vi 6 – 72 tháng).  Có 16 bệnh nhân nhóm chứng và 15 bệnh nhân nhóm PPE đều đau hai khớp gối khi đi bộ xuống cầu thang. Khoảng thời gian các đối tượng điều trị HRT/ET ở nhóm chứng là 66.2 ± 32.3 tháng (phạm vi 12 – 120 tháng), ở nhóm PPE là 69.6 ± 31.9 tháng(phạm vi 15 – 120 tháng). Có 6 bệnh nhân nhóm chứng và 4 bệnh nhân nhóm PPE trải qua ET vì phẫu thuật cắt bỏ từ cung và dùng estradiol tiếp. Những người còn lại trải qua điều trị HRT bằng estradiolvà Medroxyprogesterone acetat (5 mg/ngày) liên tục trong 10 ngày. Đối tượng dùng estradiol có kèm hệ thống dính matrix transdermal (áp dụng 1 lần vào mỗi ngày) chứa 0.72 mg 17β-estradiol được thiết kế giải phóng 50 µg mỗi ngày. Phụ nữ tham gia có trình độ học vấn từ cấp 3 đến cao đẳng, không có bất kỳ vấn đề về khớp, ví dụ có vấn đề về hông, chân có thể liên quan tới khớp gối.
Tiêu chuẩn loại trừ bao gồm: viêm khớp dạng thấp, xơ vùng cơ, đã từng bị hay đang bị gút giả, ung thư hoặc bất kỳ bệnh nghiêm trọng nào, sử dụng corticosteroid và các liệu pháp điều trị khác, sử dụng sản phẩm bổ sung dinh dưỡng để giảmđau khớp.

Bảng 1: Thông tin các đối tượng ở nhóm chứng và nhóm uống 9 viên nang nhau thai heo mỗi ngày. Dữ liệu được biểu thị là giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn

	Nhóm đối chứng (n=22)	Nhóm PPE (n=22)
Tuổi (năm) Tuổi thời kỳ mãn kinh (năm)	63.3 ± 5.8 49.8 ± 2.9	63.2 ± 6.4 50.0 ± 3.0
Chiều cao (cm)	155.8 ± 5.2	155.1 ± 5.9
Cân nặng (kg)	53.1 ± 6.6	53.0 ± 6.9
Chỉ số khối lượng cơ thể BMI (kg/m2)	21.7 ± 2.6	21.9 ± 2.6
Thời gian đau khớp gối (tháng)	37.7 ± 24.9	34.5 ± 20.7
Thời gian dung HRT/ET (tháng)	66.2 ± 32.3	69.6 ± 31.9

HRT: Liệu pháp thay thế hóc môn, ET: liệu pháp chỉ sử dụng estrogen

Nguyên liệu
Chúng tôi sử dụng dịch chiết nhau thai heo, tên thương phẩm là JBP Porcine 100 (Laennec P.O Porcine) do công ty Japan Bio Products Ltd., sản xuất với đặc điểm sau: nhau thai heo thu thập ở Nhật Bản được thủy phân bằng protease và tiệt khuẩn công nghệ cao, sau đó đông khô và được đóng vào vỏ nang. Một viên nang mềm chứa 350 mg dịch chiết nhau thai heo, hoàn toàn không có chất phụ gia.

Đo lường
Chúng tôi sử dụng Visual Analog Scale (VAS) đánh giá mức độ đau khớp gối, tình trạng đau được chia từ 0 mm (không đau) đến 40 mm (đau rất nặng).Đau khớp gối được thể hiện trên nhiều hoạt động khác như: ngồi ở ghế rồi đứng lên, đi bộ xuống cầu thang, đi bộ lên cầu thang và đi bộ đường dài. Ở phương pháp này, chúng tôi tập trung đánh giá mức độ đau khớp gối khi đi bộ xuống cầu thang và đượcđánh giá bằng VAS.Bệnh nhân bị đau hai bên đầu gối nghiêm trọng được chỉđịnh trong nghiên cứu đầu gối.Đau đầu gối đánh giá bằng VAS bắt đầu lúc 3 thángở giai đoạn quan sát (bắt đầu điều trị bằng PPE), trong suốt quá trình điều trị (ở tuần thứ 4, thứ 8, thứ 12) và 4 tuần sau khi điều trị cả 2 nhóm.
Để xácđịnh độ an toàn củađiều trị bằng PPE, chúng tôi điều tra công thức máu, quá trình trao đổi chất lúc ban đầu và sau 3 thángđiều trị bằng PPE ở nhóm 2. Một mẫu máu tĩnh mạch được lấy nhanh sau 12 h và hemoglobin, số lượng tiểu cầu, số lượng bạch cầu, AST, ALT, albumin, bilirubin, LDH, CPK, urê máu, creatinine, urat, calcium, glucose máu, cholesterol toàn phần, triglycerides và HDL, hs-CRP, lipoprotein (a) và hóc môn tuyến cận giáp được đo bởi phòng thí nghiệm ALP Company Kanazawa. Chỉ số BMI được tính bằng cân năng/ chiều cao²

Phân tích thống kê
Dữ liệu được thể hiện dưới dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (mean ± SD). Chúng tôi sử dụng kiềm tra xếp hạng là Wilcoxon để đánh giá sự khác nhau về VAS trong suốt quá trình thử nghiệm của 2 nhóm và dùng kiềm tra MannWhitney U để đánh giá sự thay đổi khác nhau về VAS giữa 2 nhóm. Kết quả được xem là có ý nghĩa thống kê khi giá trị p nhỏ hơn 0.05.

KẾT QUẢ
Tác dụng của PPE đối với bệnh đau khớp gối
Có 4 phụ nữ (2 ở mỗi nhóm) xin rút khỏi thử nghiệm vì lý do cá nhân. Bởi vậy, có 44 phụ nữ tham gia phân tích lần cuối cùng (22 người nhóm đối chứng và 22 người nhóm PPE).Sự biến đổi các chỉ số VAS về độ đau khớp gối của 2 nhóm trong suốt quá trình thử nghiệm được thể hiệnởBiểu đồ 1.
Không có sự khác nhau cóý nghĩa về chỉ số VAS lúc ban đầu (29.9 ± 8.36) và 3 tháng trước khi bắt đầuđiều trị(30.2 ± 8.30) ở nhóm PPE và chỉ số lúc ban đầu(28.2 ± 7.95) và 3 tháng trước khi bắt đầu điều trị (27.6 ± 7.73) ở nhóm đối chứng tương ứng.
Không có sự khác nhau có ý nghĩa giữa 2 nhóm về mức độ đau khớp gối ở thời điểm ban đầu.
Mức độ giảm chỉ số VAS phản ánh độ đau khớp gối của nhóm điều trị bằng PPE là có ý nghĩa: ở tuần thứ 4 (19.9 ± 10.7, p<0.05), tuần thứ 8 (15.2 ± 10.3, p<0.01) và tuần thứ 12 (12.8 ± 10.8, p<0.01) khi so sánh với nhóm đối chứng (26.7 ± 8.36; 27.3 ± 7.93; 28.2 ± 8.21 tương ứng).Điều thú vịở chỗ, tác dụng này tiếp diễn tiếp 4 tuần sau khi ngừng điều trị:  nhóm PPE (12.3 ± 11.8, p<0.01) so với nhóm chứng (29.3 ± 7.5). Khi giai đoạn thử nghiệm kết thúc, chỉ số VAS giảm là 57.2 % và 4 tuần sau khi ngừng điều trị, chỉ số VAS giảm là 59.9 % so với thời điểm ban đầu ở nhóm PPE. Chỉ số BMI không ảnh hưởng đến kết quả điều trị vì không bệnh nhân nào bị béo phì.

Biểu đồ 1: Sự thay đổi chỉ số Visual Analog Scale (VAS) phản ánh mức độ đau khớp đầu gối sau theo thời gian điều trị bằng dịch chiết nhau thai heo (PPE) hoặc canxi (đối chứng) để hỗ trợ điều trị HRT. Dữ liệu biểu thị dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (n=22). *,p<0.05; **,p

Công thức máu và khả năng chuyển hóa
Không có sự khác nhau có ý nghĩa giữa các giá trị ở thời điểm ban đầu và lúc kết thúc thử nghiệm ở nhóm PPE về: hemoglobin, số lượng tiểu cầu, số lượng bạch cầu, AST, ALT, albumin, bilirubin toàn phần, LDH, CPK, urê máu, creatinine, urat, calcium vàhóc môn tuyến cận giáp (bảng 2) cũng như nguy cơ xấu trên tim mạch như: glucose máu, cholesterol toàn phần, triglycerids, HDL, cholesterol, hs-CRP và lipoprotein (a) (bảng 3).
Bảng 2: Kết quả xét nghiệm sinh hóa trước và sau điều trị 12 tuần với dịch chiết nhau thai heo (PPE). Dữ liệu được thể hiện dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (n=22). Mọi kết quả này đều không có ý nghĩa thống kê

	Thờiđiểm ban đầu (trướcđiều trị)	Sau khi điều trị
Chỉ số khối lượng cơ thể BMI (kg/m2)	21.9 ± 2.6	21.9 ± 2.6
Hemoglobin (g/dl)	12.9 ± 1.0	13.0 ± 1.3
Số lượng bạch cầu cầu ( x 103/µl)	5.51 ± 1.0	5.71 ± 1.5
Tiểu cầu (x 104 µl)	23.8 ± 5.4	24.4 ± 5.0
AST (IU/l)	20.7 ± 7.9	19.3 ± 4.5
ALT (IU/l)	19.1 ± 21.0	15.8 ± 8.0
Albumin (g/dl)	4.37 ± 0.23	4.35 ± 0.18
Bilirubin toàn phần (mg/dl)	0.53 ± 0.21	0.60 ± 0.27
Lactate dehydrognease (IU/l)	171.4 ± 22.7	173.4 ± 21.1
Creatinin phosphokinase (IU/l)	93.0 ± 44.0	88.1 ± 33.7
Urê máu (mg/dl)	14.3 ± 3.1	14.4 ± 3.4
Creatinin (mg/dl)	0.61 ± 0.07	0.61 ± 0.08
Urat (mg/dl)	4.03 ± 1.11	4.17 ± 1.21
Calcium (mg/dl)	9.10 ± 0.55	9.14 ± 0.45
Hóc môn tuyến cận giáp (pg/ml)	37.2 ± 13.1	37.0 ± 13.6

Chúng tôi thực hiện một phân tích phụ về mức độ hs-CRP ở nhóm PPE: khi nồng độ hs-CRP của các đối tượng tăng 1.5 đến 7 lần nghĩa là có nguy cơ xơ vữa động mạch, là nguyên nhân hàng đầu dẫn đến nhồi máu cơ tim và đột quỵ. Trong 22 bệnh nhân của nhóm PPE có 7 người có chỉ số hs-CRP ≥ 0.1 mg/dl được điều trị bằng PPE đã giảm đáng kể nồng độ hs-CRP ở tuần thứ 12 (0.045± 0.027 mg/dl; p<0.05) so với thời điểm ban đầu (0.202 ± 0.078 mg/dl) (biểu đồ2). Trong khi nồng độ hs-CRP không có sự khác nhau cóý nghĩa ở thời điểm ban đầu (0.025 ± 0.013 mg/dl) và thời điểm kết thúc thử nghiệm (0.034 ± 0.027 mg/dl) ở nhóm có hs-CRP < 0.1 mg/dl.

Biểu đồ 2: Mức độ hs-CRP (high sensitivity C-reactive protein) trước và sau điều trị 12 tuần bằng dịch chiết nhau thai heo (PPE) như một liệu pháp thay thế HRT (n=7). Dữ liệu thể hiện dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn. *, p
Liệu pháp bổ sung bằng canxi hay PPE đều có sự dung nạp thuốc tốt, và không có trường hợp nào bỏ thử nghiệm do nguyên nhân của tác dụng phụ. Không có phụ nữ nào xuất hiện rối loạn kinh nguyệt được ghi lại từng ngày trong suốt quá trình thử nghiệm. Cũng không có sự khác nhau cóý nghĩa về BMI ở thờiđiểm ban đầu và thời điểm kết thúc thử nghiệm ở nhóm PPE.
Bảng 3: Nguy cơ bị bệnh tim mạch trước và sau điều trị 12 tuần bằng dịch chiết nhau thai heo (PPE). Dữ liệu biểu thị dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (n=22). Mọi kết quả thống kê không có ý nghĩa.

	Trướcđiều trị	Sau điều trị
Glucose máu (mg/dl)	90.4 ± 11.0	87.68 ± 10.16
Cholesterol toàn phần (mg/dl)	223 ± 34	222 ± 32
Triglycerid (mg/dl)	95.7 ± 45.7	86.7 ± 34.4
Cholesterol HDL (mg/dl)	76.5 ± 14.1	73.8 ± 13.2
Hs-CRP (mg/dl)	0.087 ± 0.092	0.037 ± 0.03
Lipoprotien (a) (mg/dl)	20.1 ± 22.8	22.2 ± 23.1

HDL là một loại lipoprotein phân tử cao; hs-CRP là protein phản ứng C

LUẬN BÀN
Đây là báo cáo đầu tiên chứng minh hiệu quả dịch chiết nhau thai heo (PPE) dạng uống trong quá trình điều trị HRT, bị đau khớp đầu gối kéo dài. Sử dụng PPE như môt giải pháp hỗ trợ điều trị HRT trong 12 tuần cải thiện đáng kể chỉ số mức độ đau VAS trên bệnh nhân đau khớp kháng HRT.Điều đó chứng minh rằng bổ sung thực phẩm chức năng dạng uống PPE là một lựa chọn hiệu quả đối với trường hợp kháng HRT, đau khớp gối trường kỳ.
Theo truyền thống, dịch chiết nhau thai người tiêm dưới da hoặc tiêm bắp đã được dùng điều trị các bệnh gan mãn tính, bệnh vảy nến, viêm khớp dạng thấp, đồng thời bổ sung rất nhiều chất thiết yếu cho cuộc sống như: khoáng chất,  các loại vitamin, các amino acid, protein…Ngày nay, càng ngày càng có nhiều nhà nghiên cứu tìm hiểu về tác dụng của dịch chiết nhau thai người trên ứng dụng lâm sàng và phân tích cơ chế.  Tiêm dịch chiết nhau thai người làm giảm triệu chứng viêm khớp ở mô hình chuột thử nghiệmđãđược báo cáo. Với bệnh nhân mắc OA (viêm xương khớp) cấp tínhđược tiêm dịch chiết nhau thai người vào trong khớpđã có kết quả tốt, điều này được giải thích là do làm giảm sản xuất prostaglandin E2, do ức chế hoạt động của cả cyclooxygenase-1 và cyclooxygensae-2.
Hơn thế nữa có rất nhiều báo cáo chứng minh rằng dịch chiết nhau thai người có tác dụng chống viêm. Điều đó cũng cho thấy, tác dụng giảm đau của PPE trên bệnh nhân đau đầu gối thực hiện trong thử nghiệm này cũng có thể giải thích một phần là do tác dụng chống viêm.
Nhiều người biết đến dịch chiết nhau thai ngườiđược sử dụng như một liệu pháp  làm lành vết thương truyền thống, cũng nhưhiệu quả đối với những vết thương do bỏng, sốt sau phẫu thuật và chữa lành vết thương mạn tính.  Báo cáo gầnđây chỉ ra rằng dịch chiết nhau thai người làm giảm sản xuất nitric oxide, một loại gốc tự do cóđời sống ngắn, đóng vai trò quan trọng trong việc chữa lành vết thương như một chất trung gian sửa chữa mô. Tác dụng dịch chiết nhau thai người thúc đẩy hệ thống thần kinh hồi phục cũngđược báo cáo. Gầnđây, chúng tôi thấy rằng phẫu thuật cắt bỏ buồng trứng kết hợp vớiức chế thần kinh mạn tính gây ra suy giảm vùng kíức sợ hãi và làm giảm tế bào thần kinh vùng đồi thị khu vực CA3 ở chuộtcái.Đồng thời suy giảm trí nhớ và giảm sút tế bào thần kinh vùng đồi thịở chuột cái có giảm bớt khi đượcuống PPE. Hơn nữa, tác dụng bảo vệ của dịch chiết nhau thai người trên sụn khớp bị thoái hóađược báo cáo trong thử nghiệm OA, điều đó chứng tỏ rằng dịch chiết nhau thai người có thể giảm trình trạng thoái hóa sụn khớp do ức chế giải phóng gelatinases bao gồm muối kim loại loproteinase-2 và metalloproteinase-9. Từ những kết quả trên chúng tôi đề nghị rằng cơ chế chữa bệnh của PPE trong giảmđau đầu gối là có cơ sở, một phần do tác dụng hồi phục, làm trẻ hóa của PPE. Mộtđiều đáng quan tâm nữa là tác dụng cải thiện mức độđau đầu gối tiếp diễntới 4 tuần sau khi ngừngsử dụng thuốcở nhóm PPE, suy ra từ những kết quả nêu trên có thể lý giải rằng tác động của PPE  đã có hiệu quả giúp giảm đau và hồi phục. Mặc dù chúng tôi chưa đo mật độ xương (bone mineral density – BMD) trong thử nghiệm này, cơ chế giảm đau đầu gối của PPE không hề liên quan đến việc PPE làm thay đổi BMD trung bình vì PPE không có tác dụng trên BMD của chuột cái cắt bỏ buồng trứng.
Dịch chiết nhau thai rất giàu hoạt chất sinh học như proteins, peptides, glycosaminoglycans, amino acid, RNA và DNA và đều là những thành phần góp phần phục hồi các vùng bị tổn thương. Được biết hiện nay, tất cả các hoạt chất sinh học này đều bổ sung dưới dạng uống chứ không cóđường tiêm. Điều đó không đúng chút nào khi cho rằng các chất có kích thước phân tử lớn dạng protein nhưhóc môn, enzyme, yếu tố tăng trưởng, cytokines dạng uống sẽ bị hệ thống tiêu hóa tác động và không đưa được vào hệ tuần hoàn. Chúng tôi phân tách các hoạt chất sinh học có thể thành phân tử có kích thước bé như dipeptid sử dụng dưới dạng uống cho thấythuốc vẫn vào được hệ tuần hoàn mà không bị tiêu hóa, mặc dù các loại hợp chất trong dịch chiết nhau thai hoàn toàn chưa xác định rõ hết. Cũng có thể các proteins có kích thước lớn sau khi vào hệ tiêu hóa được phân cắt thành các chất sinh học có kích thước nhỏ hơn. Vì PPE không có tác dụng trên BMD và cân nặng của tử cung chuột cái cắt bỏ buồng trứng và trong 3 tháng điều trị bằng PPE không thay đổi nồng độ hócmôn estrogen ở phụ nữ tiền mãn kinh, nên estrogen không liên quan đến tác dụng bổ sung hoạt chất sinh học của PPE.
Gần đây PPE được phát triển thành thực phẩm chức năng dạng viên uống mong đạt hiệu quả như với dịch chiết nhau thai người vì việc sử dụng dịch chiết nhau thai người bị hạn chế ở dạng tiêm. Tuy nhiên, ít người biết tới tác dụng hữu ích của PPE trong hỗ trợ điều trị hết sức đa dạng cũng như hiệu quả phụ đối với cải thiện công thức máu, quá trình trao đổi chất, đặc biệt liên quan đến những nhân tố gây hại cho bệnh tim mạch. Gần đây, đã có báo cáo chứng minh rằng dịch chiết nhau thai người tiêm dưới da không gây bất kỳ nguy hiểm nào trên tim mạch trong suốt thử nghiệm lâm sàng. Ngày nay, liệu trình điều trị thay thế estrogen ở phụ nữ tiền mãn kinh là yếu tố chính ảnh hưởng đến phản ứng protein C (CRP).Khi uốngestrogen (không dùng cách dán), CRP tăng trước khi chuyển hóa qua gan lần đầu.Ở thử nghiệm này, yếu tố nguy hiểm trên tim mạch như glucose máu tăng, cholesterol toàn phần, triglycerids, cholesterol HDL, hs-CRP và lipoprotein (a) không thay đổi trong 12 tuần điều trị bằng PPE. Đó là thông tin rất quan trọng vì PPE thường được sử dụng bởi những phụ nữ ở độ tuổi trung niên, độ tuổi có nguy cơ tim mạch gia tăng. Sự thay đổi chỉ số hs-CRP trong thử nghiệm này không có ý nghĩa, nhưng rất thú vị là chỉ số hs-CRP ở nhóm có hs-CRP cao hơn 0.1 mg/dl đã giảm xuống đáng kể khi so sánh với thời điểm ban đầu, chứng tỏ rằng PPE có thể làm giảm nồngđộ hs-CRP. Tương tự như vậy  báo cáo chỉ ra dịch chiết nhau thai người tiêm dưới da, tuy ở số lượng phụ nữ trong nhóm có hs-CRP cao hơn 0.1 mg/dl là rất nhỏ nhưng nghiên cứu là cần thiết để khẳngđịnh tác dụng của dịch chiết nhau thai.
Cuối cùng, chúng tôi giải quyết một số hạn chế của nghiên cứu.Thứ nhất, nghiên cứu này không phải là thử nghiệm bóc nhãn, và kiểm soát nhóm đối chứng giả dược, và cũng không được phân tích bằng phân tích hướng điều trị.Thứ hai, số lượng mẫu còn nhỏ và khoảng nghiên cứu ngắn. Vì vậy còn hạn chế để khẳng định độ an toàn khi điều trị bằng PPE, đặc biệt nguy cơ tim mạch phát sinh. Thứ ba, kết quả không áp dụng được trên tất cả đối tượng viêm xương khớp gối OA vì hầu hết bệnh nhân bị đau khớp gối đã không được chẩn đoán là OA bằng cách kiểm tra X quang.

KẾT LUẬN:
Đây là báo cáo đầu tiên chứng minh hiệu quả của dịch chiết nhau thai heo dạng viên uống hỗ trợ điều trị bằng HRT chữa đau gối mà không hề xuất hiện nguy cơ trên tim mạch, chứng tỏ rằng bổ sung PPE dạng uống là một lựa chọn khác bổ sung liệu pháp HRT trên bệnh nhân đau khớp kéo dài, kháng HRT.

GHI NHẬN:
Các tác giả gửi lởi cảm ơn chân thành đến Ông Taiichi Kaku (Japan Bio Products Co., Ltd.) vìđã cung cấp dịch chiết nhau thai heo (JBP porcine 100).
Mâu thuẫn lợi ích: Bài báo cáo của các tác giả không có mâu thuẫn lợi ích. Mỗi một tác giả đều chịu trách nhiệm cho nội dung các báo cáo của mình.
Nguồn kinh phí: Hoạt động nghiên cứu được hỗ trợ một phần và cấp kinh phí bởi NPO Science Research Center for Alternative Medicine, Kanazawa, Ishikawa, Japan.

Hiệu quả của chiết xuất nhau thai heo đối với nếp nhăn dưới mắt ở phụ nữ mãn kinh

TÓM TẮT
Mục đích Chiết xuất nhau thai người dạng tiêm được biết đến đến vai trò trẻ hóa da, được sử dụng từ lâu để điều trị nếp nhăn trên da và các vết thương khó lành. Chiết xuất nhau thai heo (PPE), một dạng viên uống, gần đây được sản xuất cũng dùng cho mục đích này. Mục đích của nghiên cứu này là đánh giá có hay không PPE có hiệu quả tích cực tới sự cải thiện nếp nhăn sâu dưới mắt của phụ nữ mãn kinh.

Phương pháp 
Trước tiên,chúng tôi đánh giá độ sâu nếp nhăn không xâm lấn với máy phân tích da ở 185 phụ nữ Nhật khỏe mạnh. Tiếp theo, 44 phụ nữ mãn kinh với hội chứng mãn kinh từ nhẹ đến vừa đã tham gia vào nghiên cứu nhãn mở, ngẫu nhiên, có đối chứng về hiệu quả của PPE đối với nếp nhăn. So sánh hồi cứu về độ rộng của nếp nhăn ở 123 phụ nữ mãn kinh với các triệu chứng mãn kinh được hoặc không được điều trị với PPE.

Kết quả  Độ rộng nếp nhăn bên dưới mắt ở phụ nữ độ tuổi 30 cao hơn đáng kể so với phụ nữ độ tuổi 20 -29. Uống 3 viên PPE/ ngày đã cải thiện đáng kể  (p< 0.05) các nếp nhăn này tại thời điểm so với nhóm đối chứng. Phân tích hồi cứu cho thấy nhóm uống 3 viên (p< 0.05)  và 6 viên (p< 0.01) PPE/ ngày có cải thiện đáng kể, giảm/ thu hẹp nếp nhăn đáng kể so với các nhóm không được điều trị/ nhóm chứng.

Kết luận Viên uống PPE là một lựa chọn khả thi để làm mờ nếp nhăn sâu dưới mắt cho phụ nữ

GIỚI THIỆU

Mãn kinh là thời kỳ chuyển đổi sinh lý liên quan đến một loạt các thay đổi, bao gồm các triệu chứng vận mạch, thay đổi tâm tính, rối loạn chức năng tình dục, làn da xuống cấp, gia tăng nguy cơ loãng xương và bệnh tim mạch. Một triệu chứng có liên quan tới mãn kinh ở phụ nữ là sự lão hóa da với các dấu hiệu: da khô, teo, cấu trúc lỏng lẻo, xuất hiện nếp nhăn sâu, và vết thương lâu lành. Trong số những thay đổi có liên quan đến thời kỳ mãn kinh, nếp nhăn như vết chân chim gia tăng khiến phụ nữ mất tự tin về thẩm mỹ. Lượng collagen dưới da suy giảm khi mãn kinh được báo cáo là nguyên nhân chính gây ra sự xuất hiện nếp nhăn, và có sự liên quan chặt chẽ giữa sự mất collagen và sự suy giảm estrogen trong thời kỳ mãn kinh. Người ta cũng cho rằng sự suy giảm estrogen có thể đóng góp vào quá trình giảm collagen dưới da, dẫn tới sự xuất hiện của nếp nhăn ở phụ nữ mãn kinh.

Do lợi ích của việc sử dụng hormone liều cao (liệu pháp thay thế hormone – HRT) đối với sự lão hóa của làn da mà nhiều phụ nữ đã dùng biện pháp này để cải thiện làn da. Mặc dù việc sử dụng HRT được coi là lựa chọn đầu tiên để giảm các triệu chứng mãn kinh và đem lại những thay đổi tích cực trên, việc sử dụng nó đã được đặt câu hỏi vì những rủi ro nghiêm trọng ngay cả khi sử dụng ngắn hạn (Theo báo cáo của Women’s Health Initiative. Tình trạng này đã khiến cho các nhà khoa học không ngừng tìm kiếm các phương pháp điều trị bổ sung và thay thế hiệu quả hơn, an toàn hơn để cải thiện các triệu chứng mãn kinh, bao gồm cải thiện làn da.

Y học phương Đông từ lâu đã sử dụng chiết xuất nhau thai để điều trị các triệu chứng mãn kinh. Ở châu Á, chiết xuất nhau thai người (HPE), một dạng thủy phân từ nhau thai người có tên thương mại là Laennec (sản xuất bởi Japan Bio Products Co, Ltd, Tokyo, Nhật Bản), đã được sử dụng qua đường tiêm dưới da hoặc tiêm bắp để điều trị các triệu chứng mãn kinh và vết thương khó lành. HPE đã được báo cáo là có hiệu quả trong tái tạo da và liền các vết loét mãn tính, và hiện nay nó được sử dụng trên lâm sàng để điều trị nếp nhăn trên da và các vết thương khó lành.

Chiết xuất nhau thai heo (PPE) gần đây đã được phát triển thành dạng viên uống dùng cho các mục đích tương tự như HPE.  Chúng tôi đã thấy rằng, việc uống PPE có hiệu quả đáng kể trong việc giảm đau đầu gối như một liệu pháp bổ trợ kết hợp với HRT cũng như giảm các triệu chứng thời kỳ mãn kinh. Các triệu chứng này cũng đã được công bố là đáp ứng với HPE. Các quan sát đã  dẫn chúng tôi đi đến việc đánh giá những thay đổi trong độ rộng của nếp nhăn dưới mắt của những phụ nữ trung niên Nhật Bản bằng các phương pháp điều trị không xâm lấn và đánh giá hiệu quả của viên uống PPE trong việc cải thiện nếp nhăn dưới mắt ở phụ nữ thời kỳ mãn kinh.

PHƯƠNG PHÁP

Thiết kế nghiên cứu

Nghiên cứu sự thay đổi về độ rộng nếp nhăn dưới mắt có liên quan tới tuổi tác

Chúng tôi đánh giá độ rộng nếp nhăn bằng máy phân tích da (Skin Diagnosis System New Aphrodite-III; SDSNA Co. Ltd. PSI, Suwon-City, Korea) của 185 phụ nữ Nhật Bản khỏe mạnh (độ tuổi 20–79) tham gia tình nguyện từ 5 – 2009 tới 6 – 2009 who attended our out-patient clinic from May 2009 to June 2009. Các đặc điểm của đối tượng nghiên cứu được trình bày trong bảng 1.

So sánh độ rộng nếp nhăn dưới mắt ở nhóm điều trị với PPE và nhóm không điều trị với PPE

123 phụ nữ mãn kinh với các triệu chứng mãn kinh đã tham gia vào nghiên cứu hồi cứu này. Họ được sắp xếp thành 3 nhóm: Không điều trị (n=70); nhóm uống 3 viên 350mg PPE/ ngày (chia 3 lần, uống sau ăn) (n=38); và nhóm uống 6 viên 350mg PPE/ ngày (chia 3 lần, uống sau ăn) trong 12 tuần (n = 70).

Chúng tôi đánh giá độ rộng nếp nhăn dưới mắt ở các đối tượng ở mỗi nhóm bằng cách sử dụng SDSNA và so sánh hồi cứu về độ rộng nếp nhăn giữa các nhóm.

Nghiên cứu sự thay đổi trong độ rộng nếp nhăn dưới mắt sau khi trị liệu với PPE

47 phụ nữ mãn kinh có các triệu chứng mãn kinh đã được điều trị ngoại trú tại phòng khám của chúng tôi đã tham gia vào nghiên cứu này. Các đối tượng nghiên cứu được uống 3 viên PPE 350 /ngày (dùng sau bữa ăn chia làm 3 lần) trong 24 tuần. Độ rộng của nếp nhăn dưới mắt được đánh giá bởi SDSNA tại thời điểm ban đầu, trong thời gian điều trị (tuần 12), và cuối giai đoạn nghiên cứu (tuần 24). Các đặc điểm của các đối tượng trong ba nhóm được trình bày trong bảng 3.

44 phụ nữ mãn kinh có các triệu chứng mãn kinh đã được điều trị ngoại trú tại phòng khám của chúng tôi đã tham gia vào

nghiên cứu nhãn mở, ngẫu nhiên và có đối chứng. 22 người được uống 3 viên PPE 350mg/ ngày (chia 3 lần, uống sau ăn) trong 24 tuần, và 22 người thuộc nhóm đối chứng không sử dụng PPE trong 24 tuần. Độ rộng của nếp nhăn dưới mắt ở cả 2 nhóm được

đánh giá bởi SDSNA tại thời điểm ban đầu và cuối giai đoạn nghiên cứu (tuần 24). Các đặc điểm của các đối tượng trong ba nhóm được trình bày trong bảng 4.  Các đối tượng nghiên cứu đều không sử dụng các thuốc, thực phẩm chức năng hay bất cứ biện pháp nào có thể ảnh hưởng tới độ rộng nếp nhăn dưới mắt.

Nghiên cứu này được sự chấp thuận của Hội đồng quản trị xem xét đạo đức của Hiệp hội Y học thay thế và bổ trợ Nhật Bản và sự đồng ý của tất cả các đối tượng tham gia.

Đánh giá độ rộng nếp nhăn với SDSNA
SDSNA là một công cụ thuận tiện để đánh giá độ rộng của nếp nhăn. Các đánh giá độ rộng nếp nhăn dưới mắt bằng SDSNA đã được báo cáo từ trước đó. Một cách tóm tắt, các đối tượng tham gia nghiên cứu nhắm mắt để thu được hình ảnh về vùng da dưới mắt và đánh giá độ rộng lớn nhất của các nếp nhăn trong vùng được chụp bởi SDSNA. Chúng tôi đo 3 lần và tính toán giá trị trung bình. Các đánh giá được thực hiện trong cùng điều kiện nhiệt độ và độ ẩm. Các số liệu thu được tương đối lặp với hệ số biến đổi dưới 15% và không có sự khác biệt đáng kể giữa thời điểm trong ngày và không có sự biến đổi theo mùa. Các số liệu về độ rộng của nếp nhăn dưới mắt được trong mù quáng bởi sự giám định cùng những người đã được đưa ra không có thông tin đối tượng. Các đánh giá độ rộng nếp nhăn dưới mắt được thực hiện mù bởi cùng một người đánh giá và người đó không có thông tin về các đối tượng nghiên cứu

Nguyên liệu
Chúng tôi sử dụng PPE với tên thương mại là ‘JBP Porcine 100’, được sản xuất bởi Công ty Sinh phẩm Nhật Bản (Japan Bio Products Co., Ltd. – JBP (Tokyo, Nhật Bản)14,15. Nhau thai heo được thu thập tại Nhật Bản và được xử lý với protease và khử trùng nhiệt, sau đó đông khô và đóng vào vỏ nang. 1 viên có chứa 350 mg PPE, không chứa chất bảo quản và phụ gia.

Đánh giá

Để chắc chắn về tính an toàn của PPE trong các nghiên cứu, chúng tôi đã kiểm tra các chỉ số sinh hóa máu và trao đổi chất của người tình nguyện cũng như các yếu tố nguy cơ của bệnh tim mạch như đường huyết, glycosylated hemoglobin, cholesterol toàn phần, lipoprotein cholesterol mật độ cao (HDL), CRP và  lipoprotein (a) tại thờI điểm ban đầu và sau khi trị liệu với PPE. Chỉ số khối cơ thể (BMI) được tính bằng cân nặng (kg)/ bình phương chiều cao (m2). Nhật ký sử dụng PPE được phát cho người tình nguyện tại thời điểm bắt đầu nghiên cứu và thu thập lại sau khi kết thúc nghiên cứu để khảng định sự an toàn của PPE bằng cách đánh giá những tác dụng phụ hay sự chảy máu bất thường (nếu có) trong thời gian nghiên cứu .

Phân tích thống kê

Các kết quả được biểu thị bằng giá trị trung bình.

Sự khác nhau trong độ rộng của nếp nhăn dưới mắt ở 2 nhóm nghiên cứu tại thời điểm ban đầu và trong thời gian trị liệu được đánh giá bằng phân tích kiểm định Wilcoxon. Chúng tôi đã sử dụng phương pháp kiểm định phi tham số Mann–Whitney để đánh giá sự khác biệt về độ rộng nếp nhăn dưới mắt của 2 nhóm;  p < 0.05 được coi là có ý nghĩa thống kê.

KẾT QUẢ

Sự thay đổi về độ rộng nếp nhăn dưới mắt

Nếp nhăn dưới mắt ở những phụ nữ độ tuổi trên 30 rộng hơn đáng kể so với nhóm phụ nữ tuổi 20 – 29 (Hình 1). Giá trị trung bình về độ rộng nếp nhăn ở phụ nữ 30 – 39 tuổI (p<0.05) và ở những phụ nữ trên 40 tuổI (p<0.01) cao hơn đáng kể so với nhóm phụ nữ tuổi 20 – 29.

Hình 1  Sự thay đổi có liên quan đến tuổi về độ rộng nếp nhăn dướI mắt ở những phụ nữ Nhật Bản khỏe mạnh. Dữ liệu được biểu thị bằng giá trị trung bình ± sai số *, p< 0.05, †, p< 0.01 với nhóm phụ nữ tuổi 20–29

Hiệu quả của PPE lên sự thay đổi độ rộng nếp nhăn dưới mắt

47 phụ nữ mãn kinh có các triệu chứng mãn kinh đã được trị liệu trong 12 tuần với PPE và 21 người không tiếp tục tham gia ở 12 tuần tiếp theo vì lý do cá nhân. Vì thế. 26 phụ nữ tiếp tục tham gia đến khi kết thúc nghiên cứu. Trị liệu với 3 viên PPE/ngày đã làm giảm đáng kể độ rộng nếp nhăn dưới mắt sau 12 tuần (p< 0.05) và  24 tuần (p< 0.01) so với thời điểm ban đầu (Hình 3).

Tất cả 44 phụ nữ mãn kinh với các triệu chứng mãn kinh ở mức độ vừa và nhẹ đã hoàn tất nghiên cứu này. Trị liệu với 3 viên/ ngày có hiệu quả rõ rệt (p<0.05) đối với độ rộng nếp nhăn dưới mắt tại thờI điểm 24 tuần so với nhóm đối chứng

Hình 2 So sánh độ rộng nếp nhăn dướI mắt ở 2 nhóm phụ nữ mãn kinh có sử dụng và không sử dụng PPE. Dữ liệu được biểu thị bằng giá trị trung bình ± sai số *, p< 0.05, †, p< 0.01 so với nhóm không trị liệu, ‡, p< 0.05 và nhóm uống 3viên/ ngày

Hình 3 Những thay đổi theo thời gian của độ rộng nếp nhăn dướI mắt ở phụ nữ mãn kinh được điều trị với PPE. Dữ liệu được biểu thị bằng giá trị trung bình ± sai số *, p< 0.05, †, p< 0.01 so với nhóm không trị liệu, ‡, p< 0.05 và nhóm điều trị trong 12 tuần.

Hình 4 So sánh độ rộng nếp nhăn dướI mắt giữa nhóm đối chứng và nhóm điều trị với PPE. Dữ liệu được biểu thị bằng giá trị trung bình ± sai số (n=22). *, p< 0.05, †, p< 0.01 so với thời điểm ban đầu, ‡, p< 0.05 với nhóm điều trị trong 12 tuần.

THẢO LUẬN

Đây là báo cáo đầu tiên về hiệu quả của viên uống PPE trong việc cải thiện độ rộng nếp nhăn dưới mắt thông qua các kết quả phân tích da ở phụ nữ lớn tuổi. Chúng tôi nhận thấy, độ rộng nếp nhăn dưới mắt của phụ nữ từ 30 tuổI cải thiện rõ rệt hơn so với phụ nữ độ tuổI 20 – 29.

Sự lão hóa da theo tuổi với các dấu hiệu như nếp nhăn xuất phát từ sự kết hợp giữa các yếu tố di truyền và môi trường, đặc biệt là ánh nắng mặt trời, khói thuốc, và sự suy giảm estrogen ở phụ nữ độ tuổI mãn kinh. Các kết quả nghiên cứu của chúng tôi đã cho thấy độ rộng nếp nhăn dưới mắt tăng lên từ từ theo tuổi qua những đánh giá bằng các biện pháp không xâm lấn theo các báo cáo của Youn và cs; Brincat và cs. Độ rộng nếp nhăn ở phụ nữ 60 tuổi  tăng cao hơn phụ nữ tuổI 50. Quan sát này hoàn toàn phù hợp với báo cáo của McConkey và cs, da mỏng đi bởi giảm độ dày rất phổ biến ở phụ nữ 60 tuổI và tỷ lệ loãng xương ở phụ nữ da mỏng là 83% so với 12.5% ở phụ nữ da dày.

Dễ thấy là các nếp nhăn là sự biến đổi trên da có liên quan tới lão hóa. Các nghiên cứu mô học về nếp nhăn cho thấy các biến đổi trong lớp bì với sự suy giảm lượng collagen, thay đổi cấu trúc sợi elastin, và suy giảm đáng kể lượng glycosaminoglycans. Như đã đề cập, Estrogen được cho là yếu tố làm tăng lượng collagen và gly-cosaminoglycans trong lớp bì, điều này giảI thích tại sao người ta dùng estrogen để giảm nếp nhăn trên da. HPE có thể làm giảm độ rộng nếp nhăn dưới mắt với cơ chế tương tự estrogen. Theo các báo cáo trước đây, HPE kích thích sự tăng sinh của các nguyên bào sợi của người trong môi trường nuôi cấy và HPR kích thích pha S trong chu trình tế bào của nguyên bào sợi nuôi cấy 28. Hơn nữa, gần đây chúng tôi phát hiện ra HPE kích thích sự tăng sinh và sản sinh collagen  của các nguyên bào sợi nuôi cấy.  Vì thế, có thể suy luận hiệu quả của PPE đối với nếp nhăn dựa một phần và sự kích thích tăng sinh nguyên bào sợi và sản sinh collagen, protein, peptide, glycosaminoglycans, chuỗi amino acid lặp lại của glycine-X-Y (Gly-X-Y)29, amino acids ( như proline và hydroxy-proline), RNA, và DNA. Trong số này, các hợp chất có hoạt tính sinh học thông qua đường uống vẫn chưa được biết rõ. Một lý giảI có thể phù hợp là cá protein phân tử lớn như các hormone, enzyme, yếu tố sinh trưởng, và cytokine không còn hoạt tính sinh học sau khi qua tiêu hóa và không thể đi vào hệ tuần hoàn chung. Chúng tôi suy luận các hợp chất có hoạt tính sinh học thông qua đường uống có thể là các phân tử nhỏ như  tripeptides hoặc dipeptides có thể đi vào hệ tuần hoàn mà không bị tiêu hóa ở ruột30–32. Các loạI hợp chất này đã được tổng hợp và được xác định 33,34. Có thể nói rằng các protein sau khi tiêu hóa có thể hoạt động tương tự như các nguồn hợp chất phân tử thấp có hoạt tính sinh học khác. BởI vì sau 24 tuần trị liệu với PPE, nồng độ estrogen hay hormone tuyến giáp trong huyết thanh ở các phụ nữ tham gia nghiên cứu không có sự thay đổi cho nên khó có thể khẳng định rằng estrogen hay các hormone tuyến giáp tạo ra hiệu quả của PPE.

Các tài liệu trước đây đã chứng minh rằng có sự liên quan mật thiết giữa sự suy giảm collagen dưới da và sự hình thành các nếp nhăn trên da2,3. Các phân tử collagen được đặc trưng bởi 3 chuỗi polypeptide gồm các trình tự lặp lại của amino acid Gly-X-Y cuộn lại với nhau và xoắn từ phảI qua trái. Vị trí X thường là vị trí của proline trong khi vị trí Y thường là hydroxyproline. Độ bền của chuỗi bộ 3 xoắn ốc tùy thuộc vào sự kết hợp giữa proline và hydroxy-proline, hai loạI này đóng góp 20-25% tổng số axit amin trong collagen. Gly-X-Y, một chất chuyển hóa có nguồn gốc từ collagen, kích thích sự hình thành collagen và hyaluronic acid từ nguyên bào sợi35. Thêm vào đó, hydroxypro-line dạng uống làm tăng lượng collagen hoàn tan trong da. Tuy nhiên, glycosaminoglycans cho phép các phân tử nước hòa tan nhanh hơn và tạo ra các lực nén gây ra do sức căng, giúp ngăn chặn hình thành nếp nhăn trên da. Vì thế, rất có thể PPE có chứa các trình tự amino acid lặp lại của Gly-X-Y, pro-line, hydroxyproline, và glycosaminoglycans đóng vai trò cải thiện các nếp nhăn dưới mắt.

PPE gần đây đã được phát triển dưới dạng viên uống, và gần như không có tác dụng phụ đối với quá trình trao đổi chất và chỉ số sinh hóa máu của cơ thể, đặc biệt là các yếu tố nguy cơ của bệnh tim mạch. Trong một nghiên cứu gần đây, các yếu tố nguy cơ của bệnh tim mạch không thay đổi sau 24 tuần trị liệu với PPE. Đây là thông tin quan trọng vì PPE thường được sử dụng bởi phụ nữ ở độ tuổi tiền mãn kinh và mãn kinh – những người có nguy cơ cao mắc các bệnh tim mạch37. Chúng tôi cũng quan sát thấy những phụ nữ có độ rộng nếp nhăn giảm đi sau khi dùng PPE thì  các triệu chứng mãn kinh cũng giảm đi15.

Chúng tôi đã nghiên cứu da mặt bị tiếp xúc nhiều với ánh nắng mặt trời; chúng tôi không kiểm tra các vị trí được bảo vệ khỏi ánh nắng vì các vị trí này có thể đáp ứng mạnh mẽ với PPE. Nghiên cứu này có một số hạn chế khác. Trước tiên, đây không phảI là nghiên cứu mù đôi hay đối chứng có giả dược. Thứ hai, số mẫu nhỏ và thời gian nghiên cứu tương đối ngắn. Trong tương lai cần có các nghiên cứu sâu hơn về hiệu quả của PPE đối với nếp nhăn da mặt.

Tóm lại, nghiên cứu này gợi ý rằng PPE là một dạng viên uống rất có hiệu quả để làm mờ nếp nhăn sâu dưới mắt cũng như làm giảm các triệu chứng mãn kinh ở phụ nữ trung niên.

LỜI CẢM ƠN
Các tác giả xin cảm ơn Ông Taiichi Kaku (Japan Bio Products Co., Ltd. – JBP) đã cung cấp PPE.

Xung đột lợi ích Các tác giả không có xung đột lợI ích và chịu trách nhiệm cho nội dung được viết trong bài báo này.

Nguồn tài trợ Công trình này được hỗ trợ một phần bởi Trung tâm nghiên cứu khoa học NPO về Y học thay thế, Kanazawa, Ishikawa, Nhật Bản.

References

1.Hall G, Phillips TJ. Estrogen and skin: the effects of estrogen, menopause, and hormone replacement therapy on the skin. J Am Acad Dermatol 2005;53:555–68

2.Calleja-Agius  J,  Muscat-Baron  Y,  Brincat  MP.  Skin  ageing.

Menopause Int 2007;13:60–4

3.Youn CS, Kwon OS, Won CH, et al. Effect of pregnancy and menopause on facial wrinkling in women. Acta Derm Venereol 2003;83:419–24

4. Brincat M, Moniz CJ, Studd JW, et al. 1.hormones on skin thickness. Br J Obstet Gynaecol 1985;92:256–9

1.Writing Group for the Women’s Health Initiative Investigators. Risks and benefits of estrogen plus progestin in healthy post-menopausal women: principal results from the Women’s Health Initiative randomized controlled trial. JAMA 2002;288:321–33

2.The Women’s Health Initiative Steering Committee. Effects of conjugated equine estrogen in postmenopausal women with hys-terectomy: the Women’s Health Initiative randomized controlled trial. JAMA 2004;291:1701–12

3.Panay N, Fenton A. Complementary therapies for manag-ing the menopause: has there been any progress? Climacteric 2010;13:201–2

4.Kong MH, Lee EJ, Lee SY, Cho SJ, Hong YS, Park SB. Effect of human placental extract on menopausal symptoms, fatigue, and risk factors for cardiovascular disease in middle-aged Korean women. Menopause 2008;15:296–303

5.Shukla VK, Rasheed MA, Kumar M, Gupta SK, Pandey SS. A trial to determine the role of placental extract in the treatment of chronic non-healing wounds. J Wound Care 2004;13:177–9

6.    Tiwary SK, Shukla D, Tripathi AK, Agrawal S, Singh MK, Shukla VK. Effect of placental-extract gel and cream on non-healing wounds. J Wound Care 2006;15:325–8

7.    Pal P, Roy R, Datta PK, et al. Hydroalcoholic human placental extract: skin pigmenting activity and gross chemical composition.

Int J Dermatol 1995;34:61–6

8.    Saurat JH, Didierjean L, Merot Y, Salmon D. Blistering skin disease in a man after injections of human placental extracts. BMJ 1988;297:775

13.             Placental angiogenic and growth factors in the treatment of chronic varicose ulcer: preliminary communication. J R Soc Med 1989;82:598–9

14.             Koike K, Yamamoto Y, Suzuki N, et al. Efficacy of porcine pla-cental extracts with hormone therapy for postmenopausal women with knee pain. Climacteric 2012;15:30–5

15.             Koike K, Yamamoto Y, Suzuki N, et al. Efficacy of porcine pla-cental extract on climacteric symptoms in peri- and postmeno-pausal women. Climacteric 2013;16:28–35

16.             Liu KX, Kaku TI, Yoshii Y, Kawabata K. Analgesic effect of Laennec on patients of chronic osteoarthritis and formalin-treated mice. Clin Pharmacol Ther 2004;14:25–30 (abstract in English)

17.             Yoshikawa C, Koike K, Yamazaki R, et al. Evaluation of skin condition by skin analyzer in adult women: Establishment of nor-mal ranges for values of parameters of skin condition and effect of hormone replacement therapy on skin condition. Menopause Women’s Health Jpn 2011;19:207–15 (abstract in English)

18.             Yin L, Morita A, Tsuji T. Skin aging induced by ultraviolet exposure and tobacco smoking: evidence from epidemiological and molecular studies. Photodermatol Photoimmunol Photomed

2001;17:178–83

19.             Chung JH. Photoaging in Asians. Photodermatol Photoimmunol Photomed 2003;19:109–21

20.             Castelo-Branco C, Figueras F, Martinez de Osaba MJ, Vanrell JA. Facial wrinkling in postmenopausal women. Effects of smoking status and hormone replacement therapy. Maturitas 1998;29: 75–86

21.             Brincat MP. Hormone replacement therapy and the skin. Maturitas 2000;35:107–17

22.             Brincat M, Kabalan S, Studd JW, et al. A study of the decrease of skin collagen content, skin thickness, and bone mass in the postmenopausal woman. Obstet Gynecol 1987;70:840–5

23.             McConkey B, Oxon DM, Fraser MB, et al. Transparent skin and osteoporosis. Lancet 1963;281:693–5

24.             Bosset S, Barre P, Chalon A, et al. Skin ageing: clinical and his-topathologic study of permanent and reducible wrinkles. Eur J Dermatol 2002;12:247–52

Công dụng viên thuốc uống nhau thai heo Laennec P.O. Porcine

Chiết xuất nhau thai heo 100% là sản phẩm độc đáo, duy nhất chỉ có tại JBP với thương hiệu Laennec P.O Porcine (L.Porcine). Sản phẩm chỉ chứa thuần chiết xuất nhau thai heo, không chứa bất cứ thành phần nào khác.

Nhiều nghiên cứu lâm sàng trên nhau thai heo 100% đã được thực hiện tại Nhật Bản và nhiều nước tiên tiến khác và đã làm sáng tỏ hiệu quả của chúng trên cơ thể người. Giờ đây, viên uống nhau thai heo 100% với thương hiệu Laennec - một trong hai loại viên uống nổi tiếng của Công ty Sinh phẩm Nhật Bản (JBP) đã có mặt tại Việt Nam. Khác biệt đáng kể so với những loại viên uống nhau thai khác trên thị trường hiện nay, chiết xuất nhau thai 100% của JBP sẽ mang lại những hiệu quả vượt xa mong đợi của những khách hàng khó tính nhất.

Công ty Sinh phẩm Nhật Bản (Japan Bio Products Co. Ltd. - JBP) là một công ty Dược phẩm dẫn đầu thế giới trong công nghệ chiết xuất nhau thai được thành lập năm 1954 tại Tokyo, Nhật Bản. Với 60 năm kinh nghiệm trong nghiên cứu tác dụng của nhau thai và chiết xuất các thành phần độc đáo từ nhau thai, các sản phẩm của JBP được giới chuyên môn đánh giá rất cao về hiệu quả và chất lượng ổn định của sản phẩm. 

Chiết xuất nhau thai heo 100%

Chiết xuất nhau thai heo 100% là sản phẩm độc đáo, duy nhất chỉ có tại JBP với thương hiệu Laennec P.O Porcine (L.Porcine). Sản phẩm chỉ chứa thuần chiết xuất nhau thai heo, không chứa bất cứ thành phần nào khác.
Quá trình chiết xuất nhau thai heo trải qua nhiều giai đoạn khiến cho các thành phần hoạt tính trong nhau thai ít nhiều bị phá hủy. Tuy nhiên, kết quả phân tích thành phần cho thấy, L. Porcine giữ được gần như đầy đủ các thành phần quan trọng trong nhau thai nguyên bản, cụ thể:

· Các yếu tố tăng trưởng và Cytokine: là những thành phần luôn luôn mang mã di truyền của tế bào khỏe mạnh có vai trò tạo tín hiệu cho sự tăng sinh, tái tạo của các tế bào giúp trẻ hóa các chức năng cơ thể.
· Vitamin: Điều chỉnh chức năng sinh lý của cơ thể và tạo điều kiện cho quá trình chuyển hóa diễn ra một cách dễ dàng
· Amino acid: Yếu tố thiết yếu của cuộc sống. Giữ nhiều vai trò sinh lý trong cơ thể
· Acid nucleic: Tái tạo gene. Điều chỉnh quá trình chuyển hóa trong cơ thể
· Protein: Các chất dinh dưỡng cấu tạo cơ thể
· Lipid và Acid béo: Một trong những chất có vai trò quan trọng trong việc hình thành tế bào
· Carbohydrate: Là nguồn năng lượng và duy trì cấu trúc của tế bào
· Mucopolysaccharides: yếu tố để kết nối các tế bào, có vai trò chống viêm
· Enzyme: Hỗ trợ các phản ứng hóa học trong cơ thể
· Chất khoáng: Đóng nhiều vai trò khác nhau, như điều hòa máu và thể dịch,…

Công dụng:
Các kết quả thử nghiệm lâm sàng cho thấy, L. Porcine giải quyết tận gốc các bệnh do rối loạn nội tiết tố ở phụ nữ như:
- Mệt mỏi, rối loạn kinh nguyệt
- Đau khớp gối, đau mỏi cơ
- Rối loạn vận mạch (bốc hỏa, vã mồ hôi, mất ngủ,…)
- Các dấu hiệu lão hóa trên da (Sạm da, nám da, khô da,…)
- Khô, teo âm đạo…
Đặc biệt, chiết xuất nhau thai heo đã được khử hormone nên nó không làm tăng nồng độ estrogen trong huyết thanh của người dùng. Vì vậy, các rủi ro khi sử dụng liệu pháp hormone đều được loại bỏ.

Tính an toàn của Laennec P.O Porcine đã được kiểm nghiệm qua nhiều thử nghiệm lâm sàng khác nhau. Kết quả cho thấy, sản phẩm là lựa chọn tối ưu cho phụ nữ có dấu hiệu lão hóa.

Viên uống nhau thai Laennec P.O Porcine được Cục An toàn vệ sinh thực phẩm – Bộ Y tế Việt Nam cấp chứng nhận lưu hành số 4154/2012/YT-CNTC.

Giải pháp mới cho hội chứng mãn kinh - Nhau thai heo

Hội chứng mãn kinh thường gặp với nhiều mức độ khác nhau, phần lớn phụ nữ Việt Nam đều chịu đựng giai đoạn này, một số khác sử dụng tới liệu pháp hormone nhưng hiệu quả không nhiều, lại nhiều rủi ro. Hiện nay, liệu pháp mới nhất trong điều trị hội chứng mãn kinh từ Nhật Bản đã tới Việt Nam: Liệu pháp nhau thai (Placenta Therapy).

Liệu pháp thay thế hormone và nhược điểm
Tuổi mãn kinh là một giai đoạn rất đáng lưu ý trong cuộc đời người phụ nữ. Nó được đánh dấu bởi hàng loạt các trục trặc về sức khỏe liên quan mật thiết tới sự suy giảm nội tiết tố nữ (estrogen) như rối loạn vận mạch, mất ngủ, đau khớp, mệt mỏi,…
Trong Y học hiện đại, liệu pháp thay thế hormone cho đến nay vẫn là liệu pháp điều trị nguyên nhân được sử dụng rất phổ biến qua đường uống hoặc cấy dưới da. Tuy nhiên, rủi ro rất lớn của liệu pháp này là tăng nguy cơ mắc các bệnh tim mạch, ung thư vú, ung thư tử cung, suy giảm trí nhớ,....
Chính vì những lợi ích đạt được quá ít so với những rủi ro của liệu pháp này, người ta đang tìm kiếm những liệu pháp mới an toàn hơn, hiệu quả hơn. Và Liệu pháp nhau thai là một trong số ít những “ứng cử viên” sáng giá.

Liệu pháp nhau thai (Placenta Therapy)
Placenta là tên khoa học của nhau thai. Đây là loại dược liệu đã được Y học phương Đông sử dụng từ hàng ngàn năm nay trong các bài thuốc phục hồi sức khỏe. Tuy nhiên, cho đến khi công nghệ sinh học phát triển mạnh mẽ, chúng ta mới dần dần hiểu phần nào tác dụng tuyệt vời của Placenta trong chữa bệnh, làm đẹp và chống lão hóa. Với các thành phần sinh học đặc biệt không tìm thấy được ở bất kỳ phòng thí nghiệm hay mô/ cơ quan nào khác, nhau thai là cơ quan duy nhất cung cấp cơ chế tự tái tạo cho những cơ thể già hóa và ốm yếu.
Hiện nay, Liệu pháp nhau thai đang trở thành lựa chọn tối ưu trong điều trị Hội chứng mãn kinh tại nhiều nước Á Âu như Nhật Bản, Hàn Quốc, Hồng Kông, Nga, Thụy Sỹ,...Một trong những chế phẩm nhau thai được phụ nữ Nhật rất yêu thích là chiết xuất nhau thai heo 100% với tên thương mại là Laennec P.O Porcine (350 mg/viên nang) do Công ty Sinh Phẩm Nhật Bản (Japan Bio Products Co., Ltd. - JBP) sản xuất.
Tại Nhật, các nhà khoa học đã tiến hành thử nghiệm lâm sàng để nghiên cứu tác dụng của chế phẩm nhau thai heo 100% đối với sức khỏe phụ nữ độ tuổi tiền mãn kinh và mãn kinh.

Laennec P.O Porcine – Lựa chọn tối ưu đối với Hội chứng mãn kinh

Các dữ liệu lâm sàng cho thấy, Laennec P.O Porcine có tác dụng chống viêm, giảm đau, chống lão hóa rất mạnh nên nó được dùng độc lập như một liệu pháp hiệu quả để giảm đau khớp ở phụ nữ mãn kinh. Ngoài ra, nó còn mang lại những lợi ích khác như: làm đẹp da, chống rụng tóc, chống mệt mỏi,…
Một điều đặc biệt là, Laennec P.O Porcine có nhiều hiệu quả tốt trên cơ thể nhưng lại không làm thay đổi các chỉ số xét nghiệm máu cơ bản.

Các chỉ tiêu xét nghiệm máu không thay đổi sau 12 tuần dùng Laennec P.O Porcine

Không có sự khác biệt trong chỉ số xét nghiệm các yếu tố nguy cơ của các bệnh tim mạch tại thời điểm ban đầu và 12 tuần sau khi uống Laennec P.O Porcine

Không có sự thay đổi trong kết quả xét nghiệm máu trước và sau khi dùng sản phẩm Laennec P.O Porcine, chứng tỏ sản phẩm hoàn toàn không có tác dụng phụ cho người dùng.
Hiện nay, trên thị trường có một số loại chiết xuất nhau thai. Tuy nhiên, chỉ có chiết xuất nhau thai 100% được chiết xuất theo công nghệ Laennec mới có thể cho phép giữ lại các thành phần quý giá trong nhau thai nguyên bản. Nhờ đó, sản phẩm mới đạt được hiệu quả điều trị.

Trẻ hóa làn da vượt trội với với nhau thai heo 100% nguyên chất

Các nhà khoa học Nhật Bản đã chứng minh hiệu quả chống nhăn và chống sạm da đáng kinh ngạc của chiết xuất nhau thai heo 100%.
Nhau thai là cơ quan tạm thời xuất hiện trong thời gian mang thai ở người và một số động vật có vú khác. Nó có chức năng cung cấp oxy và dinh dưỡng cho bào thai phát triển thành một cơ thể thai nhi hoàn chỉnh với hàng ngàn tỷ tế bào chỉ từ một tế bào hợp tử ban đầu. Sức mạnh đặc biệt của nhau thai đã đem đến nhiều ứng dụng trong phòng bệnh, chữa bệnh và làm đẹp cho con người.

Trong bài viết này, chúng tôi xin tổng hợp một số kết quả nghiên cứu tiêu biểu về  chiết xuất nhau thai heo 100% trong trị liệu, chăm sóc da thẩm mỹ.
Hiệu quả của chiết xuất nhau heo 100% trên da

1. Cải thiện rõ rệt nếp nhăn quanh mắt
Nếp nhăn gây ra bởi lão hóa, di truyền, các yếu tố môi trường như tia tử ngoại, khói thuốc, và sự suy giảm estrogen. Trong số các yếu tố này, tuổi tác là yếu tố có liên quan mật thiết tới nếp nhăn quanh mắt. Da trở nên mỏng hơn, khô hơn, và giảm dần tính đàn hồi.
Theo kết quả từ nhóm nghiên cứu của trường Đại học Kanazawa (Nhật Bản), chiết xuất nhau heo 100% là một lựa chọn tối ưu để cải thiện nếp nhăn quanh mắt nhờ khả năng kích thích sản sinh collagen từ nguyên bào sợi dưới da và ức chế sự tiết enzyme phân hủy collagen - Metalloproteinase (MMP)-9.
Các nếp nhăn quanh mắt xuất hiện sớm nhất, chúng “tố cáo” tuổi tác và sự già nua của bạn. Vì thế, cải thiện nếp nhăn vùng da này tức là bạn đã sở hữu được bí quyết trẻ hóa toàn bộ gương mặt.

2. Chống sạm da, nám da
Các amino acid và khoáng chất ở nồng độ cao trong chiết xuất nhau heo cùng với khả năng ức chế hiệu quả quá trình tổng hợp hắc tố là “vũ khí” trị nám rất hiệu quả. Hơn thế, các yếu tố tăng trưởng tế bào EGF, FGF giúp đẩy nhanh sự tái tạo da, khiến cho lớp biểu bì được thay mới liên tục. Nhờ đó, lớp melanin được đẩy dần dần ra khỏi da, trả lại cho bạn làn da trắng sáng, khỏe mạnh và trẻ trung mà không bào mòn da.

Hiệu quả trắng sáng đạt vượt trội khi có thêm sự hỗ trợ đắc lực của Sữa chống nắng chiết xuất nhau thai – GHC UV Protector.

Các nốt tàn nhang đã nhạt màu và giảm số lượng đáng kể sau 2 tháng dùng viên nhau heo 100%

3. Tăng tưới máu dưới da
Chiết xuất nhau thai có tác dụng kích thích tăng sinh các mạch máu nuôi dưỡng tới từng tế bào và cung cấp đầy đủ các dưỡng chất thiết yếu cho quá trình nuôi dưỡng đó. Sắc da vì thế cũng trở nên đẹp hơn rất nhiều.

4. Làm đẹp da nhờ khôi phục cân bằng nội tiết tố nữ
Rất nhiều nghiên cứu trên tạp chí Climacteric và Obstetrics & Gynecology đã chứng minh chiết xuất nhau heo 100% (tên thương mại là Laennec P.O Porcine) có hiệu quả cải thiện rất đáng kể các dấu hiệu lão hóa trên da ở phụ nữ lớn tuổi mà không làm thay đổi chỉ số xét nghiệm máu. Điều này cho thấy chiết xuất nhau heo đặc biệt an toàn đối với cơ thể người.

Vì sao bạn nên chọn nhau thai heo?
Trong số các nguồn nhau thai, nhau thai người được ưa chuộng hơn cả bởi hiệu quả trị liệu cao hơn so với nguồn nhau từ các động vật khác.
Khoảng 3 thập kỷ nay, việc thu thập nguồn nhau thai an toàn ở người trở nên khó khăn nên người ta đã tìm các nguồn nhau thai động vật để bổ sung. Trong số các nguồn nhau thai động vật, nhau thai heo được các nhà khoa học đánh giá là nguồn nhau gần gũi và an toàn nhất với cơ thể người. Các nghiên cứu lâm sàng cho thấy: Về mặt hiệu quả, không có sự khác biệt đáng kể giữa chiết xuất nhau thai heo và chiết xuất nhau thai người.
Tại JBP (Công ty Sinh phẩm Nhật Bản) - hãng dẫn đầu thế giới với 60 năm kinh nghiệm trong công nghệ chiết xuất nhau thai làm thuốc, nhiều phương pháp kiểm tra phân tử hiện đại nhất đã được áp dụng đối với nhau thai để đảm bảo an toàn tối đa cho sản phẩm. Đồng thời, JBP sở hữu công nghệ chiết xuất nhau thai rất độc đáo đã cho phép giữ được nhiều nhất các thành phần có hoạt tính sinh học quan trọng trong bánh nhau và cuống rốn. Chính điều này đã làm nên hiệu quả của chiết xuất nhau heo từ JBP trở nên an toàn và vượt trội hơn so với các chế phẩm nhau thai khác.

Trị nám hiệu quả với chiết xuất nhau thai heo 100% tinh chất

Nám da tuy không có hại cho sức khỏe nhưng ảnh hưởng của nó tới thẩm mỹ là nỗi ám ảnh của rất nhiều chị em phụ nữ. Chiết xuất nhau heo 100% có tác dụng ức chế enzyme tyrosinase – enzym xúc tác cho phản ứng tạo ra hắc tố melanin. Nhờ đó, quá trình hình thành sắc tố sẽ bị ức chế, ngăn ngừa sự hình thành vết nám mới. Đồng thời, nó làm mờ và ngăn chặn sự lan rộng của các vết nám cũ.

Các thành phần trong nhau thai heo gần giống với cơ thể người đã mang lại hiệu quả trị nám nổi bật so với các chiết xuất nhau thai từ các động vật khác.

Trên thị trường hiện nay, nhiều phụ nữ bị nám da tìm đến thực phẩm chức năng (TPCN) có nguồn gốc nhau thai của một số động vật nhưng kết quả còn khá khiêm tốn. Hơn nữa, các rủi ro của các loại TPCN này gần như chưa được đánh giá đầy đủ.
Khoảng 3 thập kỷ gần đây, các nhà khoa học Nhật Bản đã đánh giá nhau thai heo là nguồn nhau an toàn nhất hiện nay và sử dụng nó như một loại dược liệu quý để mang lại sức trẻ và tăng cường vẻ đẹp cho phụ nữ.

Chiết xuất nhau heo 100% làm giảm vết nám

Nám da tuy không có hại cho sức khỏe nhưng ảnh hưởng của nó tới thẩm mỹ là nỗi ám ảnh của rất nhiều chị em phụ nữ.
Chiết xuất nhau heo 100% có tác dụng ức chế enzyme tyrosinase – enzym xúc tác cho phản ứng tạo ra hắc tố melanin. Nhờ đó, quá trình hình thành sắc tố sẽ bị ức chế, ngăn ngừa sự hình thành vết nám mới. Đồng thời, nó làm mờ và ngăn chặn sự lan rộng của các vết nám cũ.

Mối liên hệ giữa nám da và rối loạn nội tiết tố

Nám da có thể là một trong những kết quả do rối loạn nội tiết tố. Để trị nám, người ta thường tìm cách làm tăng nội tiết tố buồng trứng nhưng điều này rất dễ làm tăng nguy cơ mắc ung thư và các bệnh tim mạch ở người dùng sau một vài năm sử dụng. Chính vì những rủi ro quá lớn đó đã khiến cho phương pháp này vẫn còn nhiều tranh cãi và người ta vẫn không ngừng tìm kiếm các phương pháp mới an toàn hơn, hiệu quả hơn.
Trong số các phương pháp mới hiện nay, Liệu pháp nhau thai là một trong số ít những “ứng cử viên” sáng giá bởi tính hiệu quả và an toàn rất cao của phương pháp này.

Tính an toàn của chiết xuất nhau heo 100%

Chiết xuất nhau heo trong chế phẩm Laennec P.O Porcine được sản xuất theo công nghệ chiết xuất đặc biệt của hãng JBP (Nhật Bản). Công nghệ này cho phép giữ lại hầu hết các thành phần hoạt tính có trong nhau thai tự nhiên.
hàm lượng Porcine

Trong quá trình sản xuất, các hormone trong nhau thai đều được khử hoàn toàn, nên người ta hoàn toàn có thể dùng lâu dài để điều trị các triệu chứng mãn kinh mà không làm thay đổi các chỉ số xét nghiệm máu. Do đó, các rủi ro như nguy cơ mắc bệnh tim mạch được loại bỏ. Điều này hoàn toàn khác với việc sử dụng nhau thai chưa qua xử lý.
Tính an toàn của Laennec P.O Porcine được thể hiện qua các nghiên cứu lâm sàng tại Nhật (Tài liệu khoa học tham khảo: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22920723)

Như vậy, chiết xuất nhau heo 100% điều hòa hoạt động của toàn bộ các cơ quan trong cơ thể, giúp phụ nữ tìm lại được làn da khỏe mạnh một cách bền vững.

Chiết xuất nhau thai heo 100% với tên thương mại là Laennec P.O Porcine (350 mg/viên nang) được sản xuất bởi Công ty Sinh Phẩm Nhật Bản (Japan Bio Products Co., Ltd. – JBP) – Công ty Dược phẩm dẫn đầu thế giới trong lĩnh vực chiết xuất nhau thai.

Laennec P.O Porcine tuy mới vào thị trường Việt Nam nhưng đã nhận được nhiều sự yêu mến của khách hàng:
* Chị Hoa (Hà Nam, 32 tuổi ): “Loại viên uống này khác biệt so với các loại TPCN trước đây tôi đã dùng, chỉ cần 2 viên vào mỗi tối, tôi có thể làm việc liên tục nhiều giờ mà không cảm thấy mệt, da dẻ đã sáng hơn rất nhiều”.

* Chị Thu (Hà Nội, 39 tuổi): “Tôi bị khó ngủ 4 năm nay, mỗi ngày tôi chỉ ngủ được khoảng 3-4h, da xanh xao và người mệt mỏi. Tôi đã điều trị rất vất vả mà không có kết quả. Tình cờ, tôi được giới thiệu viên uống này và tôi đã dùng thử. Thật bất ngờ là cứ tới 9h tối là mắt tôi díu lại. Giấc ngủ thật say đã giúp tôi cảm thấy khỏe khoắn hơn, làn da đẹp hơn, trang điểm đẹp hơn rất nhiều.”

* Chị Hải (Vĩnh Phúc – 40 tuổi): Sau khi uống viên nhau thai heo này chừng 2 tháng, tôi đã không còn bị rong kinh nữa, da mặt cũng trắng đẹp, hồng hào hơn trước nhiều.